2. 复旦大学附属中山医院检验科, 上海 200032;
3. 复旦大学附属 中山医院(厦门)院感管理部, 福建 厦门 361015;
4. 复旦大学附属中山医院心理科, 上海 200032;
5. 复旦大学附属中山医院核医学科, 上海 200032
2. Department of Laboratory Medicine, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200032, China;
3. Department of Healthcare-associated Infection Management, Zhongshan Hospital, Fudan University (Xiamen), Xiamen 361015, China;
4. Department of Psychology, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200032, China;
5. Department of Nuclear Medicine, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai 200032, China
2022年3月,由奥密克戎变异株引起的上海市新型冠状病毒(简称新冠病毒)感染疫情导致近60万人发生感染。随着大量确诊患者和无症状感染者的出院、出舱,新冠病毒核酸复检阳性的病例不断出现。感染者病毒核酸复阳患者指感染患者达到连续2次呼吸道标本核酸检测阴性(采样时间至少间隔24 h)的出院标准后,非再感染情况下新冠病毒核酸检测再次呈阳性[1]。奥密克戎流行株与原始毒株及Delta毒株相比,具有更高的传播性[2],复阳患者是否同样具有传染性,以及能否借助环境媒介而造成传播等疑问迅速成为当前关注的焦点,为此对复阳人员的口罩及病房环境污染情况进行了调研,现将结果报告如下。
1 对象与方法 1.1 研究对象2022年6月15—30日,上海市某新冠病毒感染定点救治医院收治的27例奥密克戎病毒核酸复阳人员,其中复阳患者符合《新型冠状病毒肺炎防控方案(第九版)》中“既往感染者出院(舱)后,核酸检测Ct值<35”的标准。
1.2 采样方法(1) 口罩采样。收集复阳患者当日所佩戴的口罩,使用新冠病毒专用采样拭子,蘸取采样管的液体后均匀涂抹口罩的内表面和外表面,将采样拭子置于2019-nCOV核酸检测试剂管(上海之江生物有限公司)中送检。(2)环境采样。对复阳患者所住病房的环境物体表面进行采样,主要包括:①患者病床床栏+床头柜表面+床头呼叫铃按钮;②患者床垫+床单;③患者枕头表面;④患者病床附近地面;⑤患者病房卫生间门把手+水龙头+马桶按钮;⑥患者病房门把手+房间灯开关。采样方式同口罩采样,规则的表面采集10 cm×10 cm区域,不规则的物体表面使用拭子涂抹采集。
1.3 新冠病毒核酸检测方法采集完成后的标本使用AutraMic mini4800 Plus全自动核酸提取纯化仪(上海之江生物有限公司)进行提取与新冠病毒核酸检测,全自动核酸提取纯化仪吸取300 μL标本溶液,通过实时荧光聚合酶链反应(real-time Polymerase Chain ReaCtion,RT-PCR)分析系统按照程序进行核酸提取、扩增以及检测。
1.4 环境标本新冠病毒核酸结果判定所有标本进行新冠病毒ORF1ab基因、N基因和E基因的检测。根据AutraMic mini4800 Plus全自动核酸提取纯化仪(上海之江生物有限公司)配套核酸检测说明书和扩增曲线进行如下判定:Ct值≤43的标本判定为阳性,至少2个基因阳性判断为双阳标本,仅有1个基因阳性判断为单阳标本,3个基因均为阴性判断为阴性标本。
1.5 统计学方法数据应用SPSS 20.0进行录入与分析。分类变量采用频数和百分比进行统计描述。率的比较采用χ2检验,不满足χ2检验条件时,采用Fisher确切概率法。以P≤0.05为差异具有统计学意义。
2 结果 2.1 采样对象基本情况27例复阳患者中,6例(22.22%)入院后首次新冠病毒核酸检测Ct值<35,Ct值分别为:(1)O=23.32,N=26.55;(2)O=34.99,N=34.34;(3)O=34.25,N=34.32;(4)O=30.37,N=31.32;(5)O=22.37,N=23.62;(6)O=34.74,N=35.41;其余21例(77.78%)入院后首次核酸检测Ct值≥35。两组患者除采样时住院日数外,性别、年龄、所在病房总住院人数、同住人采样当日核酸情况比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。见表 1。
表 1 入院后第一次不同核酸检测Ct值的新冠病毒核酸检测复阳患者分布情况[例(%)] Table 1 Distribution of patients with re-positive SARS-CoV-2 nucleic acid test of different first Ct test values after admission (No. of cases[%]) |
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162份环境相关标本中,16份(9.88%)新冠病毒核酸检测阳性。在不同采样位点中,床垫+床单的阳性率最高(18.52%),其次是床栏+床头柜+床头呼叫铃(14.81%),见表 2;阳性标本的Ct值均>35,见图 1。
表 2 新冠病毒核酸检测复阳患者环境污染情况 Table 2 Environmental contamination of persons with re-positive SARS-CoV-2 nucleic acid test |
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图 1 新冠病毒核酸检测复阳患者环境阳性标本Ct值分布情况 Figure 1 Ct value distribution of positive environmental specimens of persons with re-positive SARS-CoV-2 nucleic acid test |
27例核酸复阳患者口罩佩戴中位时长为[10(3,21)]h,不同口罩佩戴时长的复阳患者,其口罩内、外侧核酸结果均为阴性;复阳患者无论入院首次新冠病毒核酸检测Ct值<35还是Ct值≥35的患者,其口罩内、外侧核酸结果均为阴性。
2.4 不同核酸检测Ct值患者的环境标本检测结果入院后首次核酸检测Ct值<35组有3例患者的环境标本检测阳性,Ct值≥35组有13例患者的环境标本检测阳性,两组环境标本检测阳性率比较[8.33%(3/36) VS 10.32%(13/126)],差异无统计学意义(P=1.000)。两组患者的环境阳性标本分布情况见表 3。
表 3 不同新冠病毒核酸检测值患者的环境污染情况[份(%)] Table 3 Environmental contamination of patients with different nucleic acid test values (No. of specimens[%]) |
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将所有标本的材质分为4类:织物(床垫+床单、枕头)、硬质表面(床栏+床头柜+呼叫铃、卫生间门把手+水龙头+马桶按钮、病房门把手+房间灯开关)、地面(病床附近地面)和口罩(口罩内侧、口罩外侧),不同类型物体表面病毒污染情况比较,差异无统计学意义(χ2=7.290,P=0.063)。见表 4。
表 4 不同类型环境物体表面病毒污染情况 Table 4 Viral contamination of different types of environmental object surfaces |
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2022年3月份上海市暴发由奥密克戎变异株引起的新冠病毒感染疫情,一些确诊患者和无症状感染者在出院、出舱后病毒核酸复检阳性,部分病例的Ct值<35。研究[3]显示,约12%的新冠病毒感染者可在出院后发生复阳现象。这些患者是否具有传染性,以及是否能借助环境媒介造成传播等疑问迅速成为关注的焦点。
口罩作为与患者呼吸道直接接触的物品,其内侧最容易受到呼吸道飞沫的污染,外侧易受到手接触污染。然而,本研究发现不论复阳患者入院后首次新冠病毒核酸检测Ct值是否<35,以及佩戴时间的长短,其内、外侧采样均为阴性,表明复阳患者通过呼吸道排出病毒的能力有限,造成传播的风险极低。研究[4]显示,新冠病毒核酸复阳主要发生在康复者出院后的首月,此阶段康复者的细胞免疫功能仍处于抑制状态,体内残存的病毒尚未完全清除。另有研究[5]认为,康复者复检阳性的标本更有可能由含有新冠病毒残余RNA片段的细胞间歇性脱落所引起,且复阳患者脱落的新冠病毒载量远低于可传播阈值35[6]。一项源自武汉复阳患者的回顾性研究[7]也证实,新冠病毒感染康复患者不具有传染性。复阳的密切接触者中也未因暴露于复阳患者而出现新冠病毒核酸检测阳性[8]。鉴于上述研究结果以及本次所有复阳患者的口罩检测均为阴性,推断复阳病例不再具有传染性,导致人传人的风险极低。
此外,本研究发现复阳患者的部分环境新冠病毒核酸检测阳性,可能与该定点医院前期收治的初阳患者所导致的环境污染有关。2022年6月15日前,该定点医院收治的多为新冠病毒核酸初阳患者,在对患者周边环境进行清洁消毒过程中,可能会残留部分核酸片段,常规清洁消毒方法可能无法完全清除。尽管核酸检测是评估患者是否处于感染的金标准之一,但该方法仅能证明阳性标本有核酸污染,并不能证明有传染性的病毒存活。Ke等[9]研究显示,Ct值超过35的鼻咽标本不再能分离出具有传染性的病毒。根据国务院应对新冠病毒肺炎疫情联防联控机制综合组印发的《关于进一步优化进口物品新冠肺炎疫情防控工作的通知》中指出,常温条件下新冠病毒在大部分物品表面存活时间短,1 d内全部失活[10],但病毒的RNA并不随着病毒的死亡而迅速降解,有研究[11-12]显示仅高浓度含氯消毒剂可完全去除病毒RNA,过氧化物消毒剂、乙醇和季铵盐对病毒RNA基本无清除能力。Zhou等[13]对隔离病房环境采样检测发现,尽管患者已经出院28 d,但新冠病毒仍在寻呼机、抽屉表面检测阳性。Zhang等[14]对终末消毒后的隔离病房研究也显示,32.1%的物体表面可检测出新冠病毒的RNA,并可持续数月。本研究也发现,入院后首次新冠病毒核酸结果无论Ct值是否<35,其环境标本的污染率以及不同材质条件下的污染率比较,差异均无统计学意义,推测可能为前一阶段阳性患者出院后的清洁消毒不到位,残留的病毒片段所致。
本研究存在以下局限:(1)受研究条件限制,无法对所采集标本进行病毒分离培养,因而无法明确判断新冠病毒核酸阳性环境标本中是否存在活病毒;(2)复阳患者的入住病房并非新开病房,前期初阳患者导致的环境污染对本次研究结果分析有一定的影响;(3)受限于实验条件,无法对患者的鼻咽新冠病毒核酸阳性标本及环境阳性标本进行同源性分析,仅能对环境阳性标本的真实来源进行推测。
综上所述,本项研究结果表明新冠病毒核酸复阳患者经呼吸道传播新冠病毒的可能性低,借助环境媒介的传播风险也极低。
利益冲突:所有作者均声明不存在利益冲突。
作者贡献声明:林佳冰,实验设计、标本收集、文献查阅、文章撰写、文章修改;史庆丰,实验设计、文章修改;孙伟,标本收集;王冲:标本检测;王美霞:标本收集;刘文娟,标本收集;郎军涛,标本收集;高晓东,文章指导。
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